Polyplus通用型DNA/siRNA转染试剂的应用

jetPRIME®是由Polyplus-transfection®公司合成的专利产品，一种新型的基于阳离子聚合物的分子。jetPRIME®和DNA形成带正电荷的复合物。这些复合物通过内吞作用进入细胞，随后经质子海绵作用，内涵体在细胞质中释放DNA。当有丝分裂过程中核膜消失时，质粒大多到达细胞核。那基于此原理，小编下面就为大家介绍一下Polyplus通用型DNA/siRNA转染试剂的应用。

1、质粒转染

jetPRIME®可导致不同来源的转染粘附细胞系以及原代细胞的百分比显著增高，如下表所示。质粒是常见于细菌中的环状DNA小分子。质粒与染色体DNA分开存在和复制，在细菌中，质粒通常携带有利于细菌生存的基因。质粒可以被有意地引入所需的细胞中，并用于在特定细胞系中过表达感兴趣的基因。这种过程被称为DNA转染，是研究感兴趣的基因功能或蛋白质的常用方法。

2、基因组编辑

CRISPR/Cas9系统在哺乳动物细胞中的使用最近已经成为在特定基因座修饰细胞基因组的一种非常方便的方法。它涉及将（a）编码Cas9的一个或多个质粒、特异性gRNA和最终要插入的序列，或（b）一个或两个质粒和RNA分子（gRNA）的混合物瞬时转染到哺乳动物细胞中。

3、siRNA转染

jetPRIME®可使多种细胞系的内源性基因表达降低90%以上。例如，jetPRIME®介导的用靶向HeLa细胞中内源性层粘连蛋白A/C的10nM siRNA双链体转染HeLa细胞，将层粘连蛋白/C基因表达显著降低到几乎无法检测的水平，如下图所示。

4、不同核酸的共转染

jetPRIME®非常适合DNA和siRNA/miRNA共转染实验或几种DNA质粒的共递送。

Polyplus用jetPRIME®进行了DNA和siRNA递送，并在各种毒性极低的细胞系中观察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA，在贴壁细胞中实现了超过90%的沉默。

jetPRIME®与许多其他转染试剂相反，在有血清的环境下，它的效率更高。因此，转染复合物可以直接加到含血清培养基的细胞中。此外小编还要给大家科普一下，悬浮细胞（T和B淋巴细胞）是众所周知的难转染DNA细胞，无论哪种化学方法的试剂都很难有较好的转染效率。因此，我们通常推荐电转或者病毒转染核酸到悬浮细胞，jetPRIME®不推荐用于悬浮细胞的DNA转染。并且jetPRIME®也很难用于植物细胞的转染，因为植物细胞富含纤维素的膜阻止了jetPRIME/DNA复合物进入细胞，甚至在脱去纤维素的原生质体阶段，复合物也无法穿透进入细胞质。

以上就是小编为大家介绍的Polyplus通用型DNA/siRNA转染试剂的应用啦，希望对大家有所帮助，其他内容大家感兴趣的话可以在评论区留言。