目前，聚乙烯亚胺Polyethylenimine（简称PEI）在工业化和大规模瞬时转染表达蛋白或病毒载体领域中被广泛应用。作为阳离子高分子聚合物的一种，它具有独特的基因递送功能。本文将探讨PEI转染试剂的操作步骤以及常见问题的解析，让我们来看一看吧！
PEI转染试剂的操作步骤如下：
1）细胞的接种：为了更好的提高转染效率，请在转染前一天接种细胞，转染时细胞的密度在70%~80%效果最适宜；
2）复合物的配制：首先，需要对孔板的孔中注入由100 μL无血清培养基稀释2 μg的目的DNA，充分混匀而制备成的DNA稀释液，接着立刻向100 μL的DNA稀释液中加入4 μL的PEI 40000（货号：24765-1）转染试剂，使其轻轻混匀，最好在室温环境下孵育10~20 分钟，从而就得了DNA-PEI的核酸转染试剂复合物。在此步骤中，无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O。
3）细胞的转染：首先在复合物的形成过程中，需要移除细胞生长培养基，在每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基，加入后，直接将100 μL的 DNA-PEI核酸-PEI复合物加入到细胞中，轻柔的摇动培养板，使其混匀。
4）检测结果：将转染完成的细胞放置在37 ℃，5% CO2的培养箱中进行培养，转染后最快可在5小时后就可以检测转入基因的表达情况，具体的检测时间请自行确定，不要一概而论的确定检测时间。
在转染实验中，我们还会遇到一些问题，例如：母液多配置一点冻存起来是否可以延长PEI转染试剂得有效期？转染后是否需要换液？转染的时候是否需要无血清培养基培养？对此，小编一一进行回答。在母液配置时我们可以多配置，但不建议进行冻存，存储液可以在4℃保存3个月，在有效期内使用完毕就可；转染过程中换液的时间有所要求，如果在转染前进行了换液，那在转染后就不需要进行换液，如果转染前没有进行换液，可在转染后6-8h进行换液操作；在复合物的配制时需要使用无血清培养基，但在加入细胞时就不要求使用无血清培养基。
通过上述的PEI转染试剂的操作步骤以及常见问题解析的探讨，相信实验友友们对PEI转染试剂的使用已经有了初步的了解，如果你对PEI操作步骤还有疑问，欢迎留言讨论！
